王林发:盘点近25年来,"超级病毒"为何多数源于蝙蝠
3月10日的时候我和我的研究生一起讨论,我们是不是可以试一下模拟的抗体的测试方法。模拟的方法主要是解决这两大挑战。第一是我们要在不用活病毒测中和抗体。第二我们模拟出来的方法,应该和动物种类无关,任何动物、任何人都可以用的。 用的方法也就是应用了活病毒的做法,比如图中的病毒就是冠状病毒,冠状病毒的S蛋白,它的受体是ACE2,和ACE2结合以后就进去了(上图左边),中和抗体和S蛋白,尤其是受体结合结构域结合的话,就阻断了它的入侵,就中和了,这个是活病毒。我们通过蛋白工程把蛋白做成这个样子以后,把蛋白表达了,蓝的是S蛋白,我们只表达它的RBD很小的一部分,ACE2我们把它的跨膜部分拿掉了,就表达这部分,这是ACE2。ACE2直接包板在在ELISA板上面,为了更方便,我们把酶标,把辣根氧化酶直接它的RBD化学偶联,等RBD和ACE2一结合,放上底物,就产生蓝色反应。中和抗体跟这类完全一样,先把中和抗体和RBD的HRP蛋白(现在是没有活病毒也没有细胞,全部在酶标孔里面做)先孵育,然后再放在板上ACE2,假如是中和抗体就不能结合,不能结合的话颜色反应就没有了或者降低了。 (编辑:晋中站长网) 【声明】本站内容均来自网络,其相关言论仅代表作者个人观点,不代表本站立场。若无意侵犯到您的权利,请及时与联系站长删除相关内容! |